卫生资格检验主管技师考试要点

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　　1.铁的代谢

　　(1)铁的来源与吸收：每天的膳食，只有约10%的铁(即lmg)被吸收。铁主要是在消化道的十二指肠和空肠上段肠黏膜吸收。

　　(2)铁的转运及利用：进入血浆中的Fe2+，经铜蓝蛋白氧化作用变为Fe3+，与运铁蛋结合运行至身体各组织中。

　　(3)铁的贮存及排泄：铁以铁蛋白及含铁血黄素的形式贮存。孕妇和儿童的排泄量高出成人数倍。

　　2.铁的功能

　　(1)合成血红蛋白。

　　(2)合成含铁酶。

　　(3)参与重要代谢：如儿茶酚胺的代谢、线粒体内氧化还原反应中酶系的电子传递和DNA的合成。

　　(4)贮存铁：以铁蛋白和含铁血黄素为主。

　　(5)合成肌红蛋白。

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　　清液中水约占90%，固体成分约占10%，有形成分除精子外，尚含少量白细胞和生殖道脱落的上皮细胞等。精浆的化学成分十分复杂，除前面提到的成分外，还有各种精浆蛋白(白蛋白、免疫球蛋白、纤维蛋白原、α2巨球蛋白、纤维蛋白等，总浓度为55/75g/L)、酶类(酸性磷酸酯酶、乳酸脱氢酶-X、溶菌酶等)、激素、微量金属无素等。

　　精液检查包括精子的形态、当选量和功能;以及精浆的生物百分比学、免疫学、微生物学及精子功能等。

　　精液检查的主要的目的有：

　　①评价男性生育功能，为不育症的诊断和疗效观察提供了依据;

　　②辅助男性生殖系统疾病的的诊断;

　　③输精管结扎术后的疗效观察;

　　④计划生育和科研;

　　⑤为人工授精和精子库的筛选优质精子;

　　⑥法医学鉴定。

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　　纯淋巴细胞群的采集

　　通常利用单核细胞在37℃和Ca2+存在条件下，能主动粘附在玻璃、塑料、尼龙毛、棉花纤维或葡聚糖凝胶的特性，据此建立许多从单个核细胞悬液中去除单核细胞的方法，藉以获得高纯度的淋巴细胞群。

　　(一)粘附贴壁法

　　将已制备的单个核细胞悬液倾于玻璃或塑料平皿或扁平小瓶中，移至37℃温箱静置1h左右，单核细胞和粒细胞均贴于平皿壁上，而未贴壁的非粘附细胞几乎为纯淋巴细胞，继用橡皮刮下贴壁的细胞即为纯单核细胞群。因B细胞也有贴壁现象，用本法分离的淋巴细胞群中B细胞有所损失。

　　(二)吸附柱过滤法

　　将单个核细胞悬液注入装有玻璃纤维或葡聚糖凝胶SephadexG10的柱层中，凡有粘附能力的细胞绝大部分被吸附而粘滞在柱层中，从柱上洗脱下来的细胞主要是淋巴细胞。此法简单易行，对细胞极少损害。

　　(三)磁铁吸引法

　　利用单核细胞具有吞噬的特性，在单个核细胞悬液中加直径为3μm的羰基铁颗粒，置37℃温箱内短时旋转摇动，待单核细胞充分吞噬羰基铁颗粒后，用磁铁将细胞吸至管底，上层液中含较纯的淋巴细胞。

　　含铁血黄素尿检查

　　含铁血黄素尿为尿中含有暗黄色不稳定的铁蛋白聚合体，是含铁的棕色色素。血管内溶血时肾脏在清除游离血红蛋白过程中，血红蛋白大部分随尿排出，产生血红蛋白尿。其中的一部分血红蛋白被肾小管上皮细胞重吸收，并在细胞内分解成含铁血黄素，当这些细胞脱落至尿中时，可用铁染色法检出，细胞解体时，则含铁血黄素颗粒释放于尿中，也可用Prussian蓝反应予以鉴别。

　　参考值

　　含铁血黄素定性试验：阴性(普鲁士蓝法)

　　临床意义

　　尿内含铁血红素检查，对诊断慢性血管内溶血有一定价值，主要见于阵发性睡眠性血红蛋白尿症、行军性肌红蛋白尿、自身免疫溶血性贫血、严重肌肉疾病等。但急性溶血初期，血红蛋白检查阳性，因血红蛋白尚未被肾上皮细胞摄取，未形成含铁血黄素，本试验可呈阴性。

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　　血尿定位诊断

　　血尿的定位诊断除紧密结合临床病史、体征和X线、B超等辅助诊断手段外，尿液的实验室检查是一项非常重要的方法。 尿常规分析是血尿定位诊断的基础。血尿标本中若有明显的尿蛋白，尤其是肾小球性蛋白尿则提示尿中红细胞的起源可能来自于肾小球。肾小球性蛋白尿常以白蛋白及一些大分子的蛋白为主，而肾小管性蛋白尿则以溶菌酶、2～微球蛋白等小分子蛋白为主。尿中由红细胞破裂释放血红蛋白所致的蛋白尿在蛋白电泳时常以球蛋白为主。另外，新鲜尿标本即使发生溶血，尿蛋白量也不会很高，大量蛋白尿时常提示为肾小球性血尿。

　　非肾小球性血尿的尿液标本中一般不会出现管型。一旦尿沉渣镜检发现有管型存在，尤其是红细胞管型的出现，常高度提示为肾小球性血尿。因此在尿液常规分析时需重视对尿液沉渣的显微镜检。 尿三杯试验是一种延用已久的定位诊断方法。试验时仅在起初的10～15ml尿中发现有明显血尿，提示病变在尿道部位;若在最后10～30 ml尿中发现有血尿(终末血尿)，则提示血尿可能来自于膀胱;倘若三杯尿中均有血尿，即全程血尿，提示为上尿路出血;出血在十分末端的尿液中可高度提示埃及血吸虫病感染。但尿三杯试验操作时不易标准化，手续较为复杂，血尿不明显时其临床诊断意义常不十分明确。

　　尿红细胞形态学检查是近十几年来临床应用较为广泛的方法。其基本原理在于肾小球来源的红细胞因受肾小球基底膜的机械损伤及/或肾内渗透压梯度变化等影响，形态常发生畸变，而非肾小球性血尿的尿红细胞形态一般无上述变化发生，表现出均一的正形性。籍此可以帮助区分肾小球性血尿及非肾小球性血尿。目前临床在利用尿红细胞形态变化进行诊断方面已取得了不少的经验。

　　皮质醇检测

　　皮质醇检测-检验主管技师：

　　皮质醇是循环中含量最多的类固醇，也是由肾上腺皮质分泌的主要糖皮质激素，皮质醇具有抗炎和维持血压的生理作用，而外还与糖异生、钙的吸收以及胃酸和胃蛋白酶的分泌有关。皮质醇作为肾上腺皮质功能的指标，其血中含量的检测对于鉴别诊断Addison和Cushing病，垂体功能减退症，肾上腺增生和癌症非常有用。

　　临床意义：增高：见于肾上腺皮质增生和肿瘤、单纯性肥胖，以及摄入苯丙胺。促肾上腺皮质激素、乙醇、口服避孕药等。

　　减低：见于肾上腺皮质结核及萎缩、垂体功能减退、甲状腺功能减退和一些慢性消耗性疾病，以及摄入地塞米松、左旋多巴和金属锂等药物。

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　　血友病实验室检查

　　1)筛检试验：APTT延长，BT、PT、TT正常。

　　2)纠正试验：曾用STGT或TGT及其纠正试验。目前也可用APTT纠正试验。

　　3)凝血因子促凝活性检测：因子活性(Ⅷ：C或Ⅸ：C)减低是常用的确诊试验，依此可将各因子缺乏症分为重型(<1%)、中型(2%～5%)、轻型(6%～25%)和亚临床型(26%～45%)。

　　4)凝血因子抗原含量检测：因子抗原含量(FⅧ：Ag和FⅨ：Ag)减低或正常。

　　若结合因子促凝活性检测的结果，可配对确定各因子的交叉反应物质(CRM)属于阳性或阴性。

　　5)排除试验：做BT和vWF：Ag检测以排除vWD;做复钙交叉试验以排除各因子的抑制物(尤其因子Ⅷ抑制物)。

　　6)携带者和产前诊断：根据临床需要尚可用基因探针、DNA印迹技术、限制性片段长度多态性作携带者诊断及产前诊断。

　　7)基因分析：深入研究尚需做遗传基因分析，以确定基因突变的类型，为研究病因、发病机制和基因治疗奠定理论基础。

　　血小板聚集试验检验

　　(1)血小板聚集试验(PAgT)原理

　　浊度法：在富含血小板血浆(PRP)中加入致聚剂，血小板发生聚集，血浆浊度变化，透光度增加，将血小板聚集仪这种浊度变化转换为电信号并记录，形成血小板聚集曲线。根据血小板聚集曲线可了解血小板聚集的程度和速度。电阻法(阻抗法)是根据电阻抗原理，通过放大、记录浸泡在全血样品中电极探针间的微小电流或阻抗的变化来测定全血样品血小板聚集性的方法。近年来，出现了一种采用激光散射法进行血小板聚集检测的仪器。

　　(2)临床意义

　　1)PAgT增高：反映血小板聚集功能增强。见于高凝状态和(或)血栓前状态和血栓性疾病，如心肌梗死、心绞痛、糖尿病、脑血管病变、妊娠高血压综合征、静脉血栓形成、肺梗死、口服避孕药、晚期妊娠、高脂血症、抗原～抗体复合物反应、人工心脏和瓣膜移植术等。

　　2)PAgT减低：反映血小板聚集功能减低。见于获得性血小板功能减低如：尿毒症、肝硬化、 MDS、原发性血小板减少性紫癜、急性白血病、服用抗血小板药物、低(无)纤维蛋白原血症等。还见于遗传性血小板功能缺陷，不同的血小板功能缺陷病对各种诱导剂的反应不同。血小板无力症：ADP、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集减低和不聚集;巨大血小板综合征：ADP、胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集正常，但瑞斯托霉素诱导的血小板不凝集;贮存池病：致密颗粒缺陷时，ADP诱导的聚集常减低，无二相聚集;胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集正常;α颗粒缺陷时，血小板凝集和聚集均正常;血小板花生四烯酸代谢缺陷：ADP诱导的聚集常减低，无二相聚集，胶原和花生四烯酸诱导的血小板聚集均低下。

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　　培养基的检定与保存

　　检定

　　每批培养基制成后须经检定方可使用，检定时将培养基放37℃温箱内培养24小时后，证明无菌，同时用已知菌种检查在此培养基上生长繁殖及生化反应情况，符合要求者方可使用。

　　保存

　　制好的培养基，不宜保存过久，以少量勤做为宜。每批应注明名称，分装量，制作日期等，放在4℃冰箱内备用。

　　生化全项的概念

　　生化全项，是医院检验科的常见的血液检验化验项目，就字面来讲应该包罗万象，但并非如此，主要指的是肝功、肾功和血液电解质，血糖和血脂等。血液方面化验很多，这些是重要的、常用的，但不是全部。

　　生物化学一般简称“生化”，也就是生化项目，是医学检验的一个主要分支学科检验大项，可以有几百甚至上千种生化项目，并随着医学发展不断丰富更新。

　　临床上，为了方便，往往以“生化全项”的称呼来概括常用的生化项目，既方便医生开具检验申请单，也利于患者了解。

　　不过，不同的医院可能对本单位的“生化全项”有不同的定义，在某些项目上可以有少许差别。

　　如何鉴别血尿和血红蛋白尿

　　血红蛋白尿是指尿中游离的血红蛋白超过0.3mg/L，经尿隐血实验检查为阳性。常由于大量的红细胞被破坏，血红蛋白释放人血，并超过了肝脏的结合能力和肾脏的重吸收能力，而随尿液排出体外;血尿是指血尿是指尿液中红细胞≥3个/HP，离心尿红细胞>5个/HP，或12小时尿Addis计数>50万个，是小儿常见的泌尿系统症状。

　　鉴别如下：

　　①离心沉淀后的尿上清液：前者仍为红色，后者红色消退。

　　②镜检沉淀物：前者不见红细胞或仅见红细胞碎片，后者见大量完整的红细胞。

　　③用上清液作隐血试验：前者强阳性，后者一般阴性或仅呈弱阳性。

　　④用上清液作尿蛋白定性试验：前者阳性不变，后者结果减弱或呈阴性。